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ImmunoChemistry艾美捷绿色活/死染色解决方案

2022-11-24 21:47:11Sylvia_sc

ImmunoChemistry艾美捷绿色活/死染色是一种活细胞不渗透、绿色荧光发射DNA染料,用于生存能力、细胞凋亡和坏死研究以及固定细胞核染色。本产品与坏死或渗透化细胞的dsDNA/细胞核结合,可与活细胞染料结合使用,用于活/死鉴别。使用流式细胞仪或荧光显微镜分析样品。

绿色活/死染色是一种用于区分活细胞和死细胞的不透膜荧光活性染色剂。这种绿色活/死染色剂是一种重要的染料,具有完整的细胞膜排斥特性,类似于流行的红色荧光活性染料碘化丙啶(PI)、7-氨基放线菌素D(7-AAD)和DRAQ7. 与红色荧光DNA染料一样,绿色活/死染色因其极性而被排除在完整的健康细胞之外。在存在表现出受损膜完整性的细胞时,绿色活/死染色穿透细胞和核膜屏障,并以类似于PI和7-AAD的方式紧密插入DNA。当与DNA结合时,它在绿色发射范围内获得极大增强的荧光电势(>2000X)。这些重要的重要染料特性使绿色活/死染色能够用于基于流式细胞术的方案和显微镜分析技术,以评估样本细胞群中晚期凋亡、坏死和膜受损细胞的百分比。绿色荧光发射允许新的染料组合用于理解细胞死亡和凋亡,例如与红色SR-FLICA检测、远红色FLICA 660半胱天冬酶检测和其他可见范围荧光标记配体一起使用。绿色活/死染色只染色死细胞和渗透细胞的细胞核。绿色活/死染色不会进入完整的活细胞。细胞可以固定或渗透,以使用绿色活/死染色作为核复染剂。绿色活/死染色的毒性可忽略不计,可用于长期生存能力测定,以评估细胞毒性和细胞凋亡。对于显微镜应用,绿色活/死染色将作为IF、IHC、高含量筛选和基于细胞的分析中固定细胞和组织样本的DNA复染剂。

ImmunoChemistry艾美捷绿色活/死染色试剂化学性质:

目标死亡细胞,坏死

当与核酸结合时,激发/发射495 nm/>512 nm

分析方法流式细胞术、荧光显微镜

样品类型细胞培养

储存-20°C

以500µM提供

ImmunoChemistry艾美捷绿色活/死染色试剂流式细胞术

每个50µL小瓶足以进行1000次流式细胞仪测试。

在微型离心机中短暂旋转解冻的小瓶,以去除可能被困在瓶盖中的任何试剂。

在PBS中稀释1:100的绿色活/死染色浓缩储备溶液(500µM),以制备5000 nM的工作溶液。例如,向990µL PBS中加入10µL储备浓缩液。只准备实验所需的东西。应立即使用工作溶液,并丢弃任何剩余的稀释溶液。

用1:100稀释的5000 nM工作溶液加标样品。例如,用5µL工作溶液加标0.495 mL样品。

在室温下避光培养样品约10分钟。

使用488nm蓝色激光和530/30(FL1)发射滤光片设置或类似设置的流式细胞仪进行分析。

荧光显微镜

每个50µL小瓶足以容纳100个微量滴定板孔。

在微型离心机中短暂旋转解冻的小瓶,以去除可能被困在瓶盖中的任何试剂。

在PBS中稀释1:100的绿色活/死染色浓缩储备溶液(500µM),以制备5000 nM的工作溶液。例如,向990µL PBS中加入10µL储备浓缩液。只准备实验所需的东西。应立即使用工作溶液,并丢弃任何剩余的稀释溶液。

用1:10稀释的5000 nM工作溶液加标样品。例如,用50µL工作溶液加标0.45 mL样品。

在室温下避光培养样品约10分钟。

当与DNA结合时,绿色活/死染色的峰值吸收为495nm,最大发射为512nm。使用最接近这些设置的光学过滤器,用荧光显微镜进行可视化。

 

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