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ImmunoChemistry艾美捷高级钙素AM细胞活力试剂盒方案

2022-11-24 21:47:11Sylvia_sc

ImmunoChemistry艾美捷ICT的Advanced Calcein AM Cell Viability Kit将Calcein AM与7-AAD相结合,可轻松同时标记单个样本中的活细胞、膜受损细胞和死细胞。钙黄绿素AM用于检测绿色荧光的活细胞,而7-AAD用于检测红色荧光的坏死或晚期凋亡细胞。可以使用流式细胞仪或荧光显微镜分析样品。

评估细胞活力是评估新药物治疗和潜在细胞毒性治疗的关键步骤。ICT的Advanced Calcein AM Cell Viability Kit将Calcein AM与7-AAD相结合,可轻松同时标记单个样本中的活细胞、膜受损细胞和死细胞。钙黄绿素AM是一种透膜的荧光试剂,因其在评估不同细胞群体的相对细胞生存状态方面的效用而被广泛认可。钙黄绿素AM的整体疏水性使其能够以浓度梯度依赖的方式轻易穿过细胞膜的脂质双层结构。一旦进入细胞内,疏水性和非荧光钙黄素AM就会被活细胞中活跃的细胞内酯酶迅速水解。这导致两个非极性乙酰氧基甲酯(AM)基团的裂解和去除。一旦AM基团被裂解,产生的极性(亲水性)且现在具有荧光能力的钙黄绿素染料分子被有效地保留在细胞膜的范围内。由于细胞膜的疏水性脂质双层组成,极性染料分子自然会被排除在被动扩散回细胞之外。死亡细胞缺乏活性酯酶,不能裂解钙黄嘌呤AM。细胞膜完整性的丧失,通常表明坏死或晚期细胞凋亡,可以使用活性染色染料7-AAD(一种红色荧光活/死染色剂)来检测。这种染料很容易穿透细胞膜受损的细胞,与富含GC的DNA区域紧密结合。将这两种不同类型的荧光细胞状态指示试剂组合在一次测试中,通过能够识别绿色荧光钙黄绿素阳性细胞群中7-AAD阳性细胞与7-AAD阴性细胞的百分比,可以更好地分辨活细胞群和死细胞群。可以使用流式细胞仪或荧光显微镜分析样品。

ImmunoChemistry艾美捷高级钙素AM细胞活力试剂盒化学性质:

试剂名称Calcein AM,7-AAD

靶向细胞内酯酶,富含GC的DNA

激发/发射494 nm/520 nm、546 nm/647 nm

分析方法流式细胞术、荧光显微镜、荧光平板读取器

样品类型细胞培养

存储Calcein AM≤-20°C,2-8°C时的其他部件

ImmunoChemistry艾美捷高级钙素AM细胞活力试剂盒组分:

Calcein AM Reagent, 1 vial, #6696

7-Aminoactinomycin D (7-AAD) vital dye, 0.26 mg, 2 vials, #6163

Hoechst 33342, 1 vial, #639

10X Cellular Assay Buffer, 60 mL, 1 bottle, #6695

Kit Manual

 

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